尊龙凯时的左旋咪唑是一种合成的驱虫药物,广泛应用于兽医学领域,专门用于治疗由线虫引起的寄生虫感染。作为一种驱虫药,它的主要靶点是线虫的乙酰胆碱离子通道受体(据Martin等人研究)。除了医学领域的应用外,左旋咪唑在多个研究方向也得到了广泛采用,特别是在秀丽隐杆线虫的麻痹实验中。此药能够有效诱导线虫瘫痪,为神经元功能和肌肉生理学的研究提供了宝贵的实验材料。
为了更深入地了解相关的毒理学实验,下面将举例说明如何使用左旋咪唑进行实验,研究人员可以依据此案例来设计他们自己的毒性研究,使用不同的可溶性药物。
实验材料
本实验所需材料包括:带盖的6孔板、NGM培养基、M9缓冲液、左旋咪唑原液(100mM水溶)、同步成虫种群及WMicrotracker Arena设备。
实验步骤概述
1. 微孔板制备:遵循标准程序制备NGM;在加入盐和胆固醇后,立刻将左旋咪唑加入55°C的NGM琼脂溶液中;左旋咪唑片未接种OP50中;制备后需在两周内使用,并存放于4°C的容器中;测定工作在实验开始前,将板降至室温进行。
2. 在NGM培养皿中培养同步的成虫种群(OP50);
3. 使用M9缓冲液将蠕虫从培养皿中取出,转移到15毫升的无菌试管中;
4. 让虫子静止。倒掉上清液,注意不要扰乱沉淀;
5. 用5ml M9缓冲液进行清洗,短暂摇动或翻转试管;
6. 重复上述步骤,倒出上清液后加入3ml M9缓冲液;
7. 计数三份样品,每10μl中虫的数量并计算平均值;
8. 配制悬浮液,得到[35虫/10μl]的浓度;
9. 将10μl的虫液转移至6孔板中;
10. 使用WMicroTracker Arena观察蠕虫活动。
备注:至少进行3次技术重复和2次生物重复,以确保实验的可靠性。
实验结果
实验结果显示,左旋咪唑对N2线虫运动活性的抑制作用呈现剂量依赖性。在6孔板中,每个孔挑选35个年轻成虫N2,在23°C下记录4小时的活动数据。结果是基于四个独立实验的平均值,便于后续的重复实验分析。
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