慢病毒感染细胞 | 为什么您的感染效率较低？

慢病毒不仅能够感染分裂和非分裂细胞，还能有效地将外源基因整合到宿主染色体中，从而实现持久的基因表达，并且不易引发机体免疫反应。因此，它常被称为“细胞实验的理想选择及体内实验的必备工具”。在基因治疗方面，慢病毒作为载体在各类遗传性和后天性人类疾病的治疗中得到了广泛应用：从基础研究到临床应用，高纯度、高滴度的慢病毒都是基因操作的理想工具。

尽管慢病毒的应用如此广泛，但由于实验中所用细胞类型的不同，感染效率可能会有所差异。要想提高慢病毒的感染效率，合理的实验步骤和最佳实验条件至关重要！以“24孔培养板、贴壁细胞”为例，慢病毒感染细胞的常规操作流程为：

Day 0：接种细胞 - 每孔接种5×10^5个待感染细胞，使用含10% FBS的DMEM培养基进行培养；

Day 1：细胞感染 - 在感染前，根据说明书配制感染液，吸掉旧的培养基后更换为感染液。根据细胞的MOI值，计算所需的病毒量并加入病毒进行感染，混匀。

Day 2：换培养基 - 在病毒感染8-16小时后，将培养基更换回常规培养基，继续培养；

Day 3-4：确认感染效果 - 感染72小时后，通过显微镜观察感染效果，如EGFP和Cherry的表达情况。

如果您认为所有细胞操作都如此简单，那就大错特错了！在慢病毒感染细胞的过程中，我们可能会遇到各种问题。其中，MOI（Multiplicity of Infection，复感染指数）是一个非常关键的指标。如何确定MOI值呢？

MOI是病毒对细胞感染能力的指标，MOI越高，细胞越难被感染。通常情况下，MOI的计算方式为：MOI =（病毒滴度 × 病毒体积）/ 细胞数目。选择感染条件及MOI时应遵循以下原则：

1. 在细胞形态不受影响的情况下，尽可能使用较少的病毒感染细胞；

2. 选择感染效率约为80%的条件作为最佳感染标准。

通过细胞感染的预实验，可以确定慢病毒对细胞的最佳感染条件，从而确定实验中的MOI值并进行正式实验。在这一领域，[尊龙凯时]将为您提供优质的慢病毒产品与服务，助力您的科学研究与临床应用。