培养基倾注温度的小常识

1. 温度调节

培养基倾注的理想温度约为45℃。当培养基放置于手心时感到温暖，但放于手背时却觉得有些烫，这时的温度大致就是45℃。如果倾注时温度过高，可能导致凝固时间延长，还容易在皿盖上出现冷凝水，这对后续实验并不利。而温度过低可能会导致在倒板过程中瓶内的培养基部分凝固。

2. 添加成分

有些培养基需要添加特定成分，这些成分在加入前需先调至室温，以避免冷液体导致琼脂凝结或出现片状物。

3. 静置时间

目前，大多数实验室会将灭菌后的培养基放置在水浴或烘箱中，使用时直接倒板。然而，培养基的静置时间不应过长，一般不超过4小时。静置时间过长可能导致琼脂少量凝固，出现絮状析出。

4. 平板准备

在倒皿之前，平皿的温度应保持在35℃至40℃之间。若需要进行表面接种，带有冷凝水的平板表面容易导致细菌蔓延。这种情况下，可以将平板放置在有气流的无菌净化台内，轻轻吹干培养基表面。但要注意不要过度干燥，以免在培养过程中造成平板破裂。

5. 倾注量

平板的倾注量通常在18至20mL。如果培养时间超过48小时，或培养温度高于40℃，为防止水分过量蒸发导致平板开裂，可以适当增加倾注量至25mL左右。

6. 避免气泡

在倾注平板时，尽量贴近平皿壁慢慢倒入，以将气泡留在瓶底。如果平板中出现少量气泡，可以轻轻摇动平板，将气泡移至平板壁，不会影响结果观察。

7. 混合均匀

每个平板中加入10mL已融化的琼脂培养基后，应迅速往复摇动和转圈晃动5至15次，以确保培养基与接种物充分混合。

8. 培养

待平板冷却后，翻转并置于适宜的温度下进行培养。

在整个操作过程中，要特别注意避免污染。在使用前，应将装有培养基的瓶子或试管松动，然后放在滚水或蒸汽浴中进行溶解，确保培养基不被过热而变质。此外，确保已经消毒的培养皿数量比需要测量的样品数量多一个，以用作空白对照。

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