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尊龙凯时人胸腺活化调节趋化因子(TARC)Elisa试剂盒使用指南

发布时间:2025-03-12   信息来源:尊龙凯时官方编辑

本试剂盒仅限于科学研究用途,不可用于医学诊断。本文将介绍人胸腺活化调节趋化因子(TARC)的ELISA试剂盒使用说明及相关检测原理。

尊龙凯时人胸腺活化调节趋化因子(TARC)Elisa试剂盒使用指南

检测原理

此试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。首先在包被微孔中加入预先包被的adropin(AD)抗体,然后依次添加样品、标准品及HRP标记的检测抗体。经过温育和彻底洗涤后,使用底物TMB进行显色反应,TMB在过氧化物酶的催化下变为蓝色,随后在酸性环境中转化为黄色。显色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关性。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),进而计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中需避免任何细胞刺激。收集血液后,进行3000转/分钟离心10分钟,迅速小心地分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,经过3000转/分钟离心30分钟后取上清液。
3. 细胞上清液:进行3000转/分钟离心10分钟以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合并捣碎,随后的3000转/分钟离心10分钟后取上清。
5. 保存:如无法及时检测样本,建议按一次用量分装并置于-20℃冷冻,避免反复冻融,并在室温下解冻,同时确保样本充分均匀解冻。

自备物品操作注意事项

本试剂盒包含标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。

试剂的准备

20×洗涤缓冲液稀释:将蒸馏水按1:20的比例稀释,即1份的20×洗涤缓冲液需加入19份蒸馏水中。

洗板方法及操作步骤

绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品的浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标,绘制标准品线性回归曲线,通过曲线方程计算各样本的浓度值。

本试剂盒说明仅供参考,使用前请仔细阅读。如需了解更多,请选择尊龙凯时品牌的产品和服务,我们将竭诚为您提供支持与帮助。