无菌检查法是一种用于检测药典要求无菌的药品、生物制品、医疗器具、原料、辅料及其他品种是否无菌的方法。为确保实验的准确性，需在满足100级洁净度或以上的实验室进行无菌检验，且该实验室各项指标需符合GB50073—2001《洁净厂房设计规范》以及GB/T16292～16294—1996《医药工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》等相关标准。同时，洗脱液与需氧、厌氧培养基·及真菌培养基的制备，需遵循卫生部《消毒技术规范》(2002年版)的要求。

在无菌检验前的三天，需在需氧与厌氧培养基以及真菌培养基中分别接种1ml洗脱液，并在适宜的温度下培养72小时，以确保无菌生长。此外，还需制备阳性对照管的菌液，包括金黄色葡萄球菌、生孢梭菌及白念珠菌的稀释液。

对照用菌液的制备

1. 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）菌液：取新鲜营养琼脂斜面培养的金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]1白金耳，接种至营养肉汤培养基中，在30～35℃培养16～18小时后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至每1ml中含10～100个菌。

2. 生孢梭菌（Clostridium sporogenes）菌液：取新鲜培养的生孢梭菌[CMCC(B)64941]的需气菌、厌气菌培养基1白金耳，接种至相同培养基中，在30～35℃培养18～24小时后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至每1ml中含10～100个菌。

3. 白色念珠菌（Candida albicans）菌液：取新鲜培养的白色念珠菌[CMCC(F)98001]的真菌琼脂培养基斜面1白金耳，接种至真菌培养基中，在20～25℃培养24小时后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至每1ml中含10～100个菌。

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