在生物医疗领域,电泳实验是分析和分离生物分子的重要手段。在此过程中,使用适当的电泳缓冲液至关重要。以下是两种常用的电泳缓冲液的配方和制备方法,适合在实验室内准备,特别是对于科研人员和技术人员。
1. 50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液
该缓冲液的终浓度配制为1L,以下是各成分的用量:
- 2 mol/L Tris碱:242 g
- 1 mol/L 乙酸:571 ml的冰乙酸(174 mol/L)
- 100 mmol/L EDTA:200 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
- 补足至1L水
2. 5×Tris-硼/酸(TBE)缓冲液
该缓冲液的终浓度配制为1L,成分及用量如下:
- 445 mmol/L Tris碱:54 g
- 445 mmol/L 硼酸盐:275 g
- 10 mmol/L EDTA:20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)
- 补足至1L水
3. 染料配制
在电泳过程中,染料是关键的成分之一,以下是几种常用染料的配制方法:
- 1%溴酚蓝:将1 g水溶性钠型溴酚蓝溶解于100 ml水中,搅拌直至完全溶解。
- 1%二甲/苯青FF:将1 g二甲/苯青FF溶解于足量水中,定容至100 ml。
- 10 mg/ml的溴化乙锭:小心称取1 g溴化乙锭,转移至广口瓶中,加入100 ml水,使用磁力搅拌器搅拌至溶解,铝箔包裹并存于4℃。
4. 凝胶上样液配制
在电泳实验中,凝胶上样液乃重要的组成部分,以下是几种不同的上样液:
6×碱性凝胶上样液
- 0.3 N氢氧化钠:6 mmol/L
- 18%聚蔗糖(400型):300 µl
- 0.15%溴甲酚绿:120 µl
- 0.25%二甲/苯青FF:
- 用氢氧化钠、电解质水及其他成分补足至10 ml。
6×甘油凝胶上样液
- 0.15%溴酚蓝:
- 0.15%二甲/苯青FF:
- 50%甘油:15 ml
- 用0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)及其他成分补足至10 ml。
使用这些缓冲液和染料时,确保遵循实验室操作规程,以提高实验的准确性和重现性。通过选择合适的电泳缓冲液,科研人员可以更好地分析和分离目标生物分子,实现更为精确的实验成果。而尊龙凯时品牌所提供的高质量实验材料,可以为您的实验室提供全面的支持,帮助您在生物医疗领域的研究中获得成功。